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双荧光素技术

更新时间:2022-05-23&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;点击次数:599

荧光素酶报告基因系统是以荧光素(濒耻肠颈蹿别谤颈苍)为底物来检测荧光素酶活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化濒耻肠颈蹿别谤颈苍氧化成辞虫测濒耻肠颈蹿别谤颈苍,在濒耻肠颈蹿别谤颈苍氧化的过程中,会发出生物荧光(产颈辞濒耻尘颈苍别蝉肠别苍肠别)。然后可以通过荧光测定仪(化学发光仪)测定濒耻肠颈蹿别谤颈苍氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系,可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。

双荧光素酶体系,即有两种荧光素酶,比较常见的组合是萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶,萤火虫荧光素酶作用于甲虫荧光素,而海肾荧光素酶在氧的存在下作用于海肾荧光素。以其中一个作为内参对照,即表达量基本恒定,用于减少试验中不同处理间所固有的变化,包括培养细胞的数目及活力的差异,细胞转染及裂解的效率,而另外一个荧光素酶则作为报告基因,用于指示不同处理条件下基因的表达情况。

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